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Derarrollo de herramientas de biología sintética para la bacteria no modelo Burkholderia sacchari: un nueva plataforma para una producción más limpia

Abstract:

La diversidad metabólica en microorganismos puede proporcionar la base para crear nuevos productos bioquímicos. Sin embargo, la mayoría de los proyectos de ingeniería metabólica utilizan un puñado de organismos modelo establecidos y, por lo tanto, un desafío para aprovechar el potencial de las funciones microbianas novedosas es la capacidad de expresar nuevos genes o utilizar directamente organismos no modelo. La manipulación genética de microorganismos que no son modelos aún es un desafío debido a los matices específicos del organismo que dificultan las herramientas genéticas moleculares universales. Sin embargo, en los últimos años, se han logrado avances sin precedentes en biología sintética y el desarrollo de herramientas de genética molecular. Es por ello que el objetivo de este estudio es desarrollar herramientas útiles de biología sintética para potenciar el uso de la bacteria no modelo Burkholderia sacchari, como alternativa de producción biológica, ya que se ha comprobado que puede sintetizar varios productos de alto valor usando diversas fuentes de carbono. En este trabajo se utilizaron los plásmidos BglBrix, un estándar que incluye todas las partes biológicas básicas necesarias para que un vector sea eficiente, estable y cumpla su función dentro de la célula. La transformación de células de Burkholderia sacchari con los plásmidos BglBrix se realizaron por método químico utilizando RbCl, obteniendo una alta eficiencia de transformación. Ensayos de dosis-inducción fueron realizados para evaluar la expresión de las proteínas fluorescentes a una máxima concentración de inductor.