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Detección por medio de la técnica RT-PCR de los virus CymMV y ORSV en el cultivo de orquídeas

Abstract:

Revista semestral de la DIUC 41 Detección por medio de la técnica RT-PCR de los virus CymMV y ORSV en el cultivo de orquídeas Paulina G. Villena Ochoa Facultad de Ciencias Agropecuarias, Universidad de Cuenca, Cuenca, Ecuador. Autor para correspondencia: paulina.villena@ucuenca.edu.ec Fecha de recepción: 7 de marzo 2013 - Fecha de aceptación: 21 de junio 2013 RESUMEN El Cymbidium mosaic potexvirus (CymMV) y Odontoglossum ringspot tobamovirus (ORSV), constituyen dos de los virus más prevalecientes y económicamente importantes en el cultivo de orquídeas. Ambos virus han ocasionado incalculables pérdidas a los cultivadores, convirtiéndose en patógenos severos que reducen el vigor de la planta, calidad de las flores y lo que es peor no pueden ser controlados por ningún método. El método de diagnóstico basado en la reacción en cadena de la polimerasa con transcripción reversa (RT-PCR) fue aplicado en la presente investigación para la detección de CymMV y ORSV. Se realizó un estudio comparativo mediante la realización de pruebas serológicas (método ELISA) y RT-PCR, con los resultados se pudo certificar plantas libres de virus a través de la selección de meristemos destinados a la micro-propagación y obtención de plantas sanas. Se evaluaron muestras de hojas, flores, bulbos y plántulas reproducidas in vitro de distintas especies de Catleya de plantas saludables o con señales clínicas de infección. Los ensayos se realizaron en Laboratorio de Biotecnología Molecular de la Empresa Concepto Azul SA en Guayaquil, Ecuador. Los resultados obtenidos mostraron que la técnica de RT-PCR aplicada al diagnóstico de ambos virus es más sensible que el ELISA. Por lo cual, la RT-PCR fue más eficiente para detectar infecciones por CymMV y ORSV. El CymMV fue detectado preferencialmente en hojas, flores y en menor grado en bulbos, mientras que el ORSV solo fue detectado en hojas y bulbos, pero no en flores. Esto condujo a describir sintomatologías asociadas con cada tipo de infección.