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Determinación de vitamina B2 (Riboflamina) por Cromatografía líquida de alta eficacia (HPLC) en el Laboratorio ECUACHEMLAB Cía. Ltda.

Abstract:

La validación de métodos analíticos es un proceso indispensable que los laboratorios deben implementar para garantizar que los resultados obtenidos en los análisis son fiables y reproducibles con un fundamento y análisis estadístico. De igual manera la metodología empleada para la validación muestra un gran desempeño en las condiciones de trabajo de Ecuachemlab Cía. Ltda. Para la determinación de Vitamina B2 (Riboflavina) por Cromatografía Líquida de Alta Eficacia (HPLC) se empleó la metodología descrita en el Método AOAC 970.65 modificado y la norma ISO/IEC 17025 que describe las directrices y parámetros para la validación del método asegurando la validez de los resultados. Los parámetros analíticos que se determinaron son: linealidad, rango de trabajo, límites de detección y cuantificación, precisión, exactitud e incertidumbre. Los resultados obtenidos muestran para la linealidad un coeficiente de correlación superior a r=0,999 para cada curva de calibración, el LD es igual a 0,002 µg/ml y el LC es de 0,08 µg/ml. El rango de trabajo comprende una concentración de 0,008 µg/ml de riboflavina como límite inferior y 1,003 µg/ml de riboflavina como límite superior. El coeficiente de variación por repetibilidad y reproducibilidad es menor al 3 y 5% respectivamente, para determinar la exactitud se consideró un Z-score que se encuentra dentro de los límites establecidos para cada MRC. Finalmente se determinó una Incertidumbre Combinada y Expandida para los tres primeros niveles establecidos de +/-0,04 y +/-0,08 mg de vitamina B2 por cada 100 g de muestra respectivamente. Para el último nivel se estableció un valor de Incertidumbre Combinada de +/-0,05 e Incertidumbre Expandida igual a +/-0,09 mg de vitamina B2 por cada 100 g de muestra, trabajando a un intervalo de confianza del 95% con un factor de cobertura k=2.