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Determinación del cariotipo del babaco (Vasconcellea x heilbornii "babaco" (V. M. Badillo) V. M. Badillo)

Abstract:

El babaco (Vasconcellea × heilbornii ‘Babaco’ (V.M. Badillo) V.M. Badillo), es un híbrido originario del sur del Ecuador, perteneciente a la familia Caricaceae, se cree que V. stipulata y V. pubescens son los parentales de esta especie, pero esto no ha sido confirmado. Este cultivo tiene importancia económica en el Ecuador, pues se produce para consumo interno, y tiene un gran potencial de exportación. El objetivo de este proyecto es la obtención del cariotipo del babaco, para ello, primero se estableció un protocolo para la observación de cromosomas, probando diferentes tratamientos. El protocolo obtenido constó de los siguientes pasos: pretratamiento con 8-hidroxiquinoleína 0.002M por 4 horas a 4oC, fijación con etanol-ácido propiónico (3:1) por 24 horas a 4oC, digestión enzimática con celulasa y pectinasa, al 5% y 1% respectivamente, por 2 horas a 37oC, y tinción con aceto-orceína 1%. Después se buscó la hora a la que se podía encontrar un mayor número de células en división celular (07:30), en donde se calculó un índice mitótico de 4.28%, y un índice de fase (metafase) de 53.33%. Luego, mediante conteo de cromosomas, se confirmó un número cromosómico 2n=2x=18 para el babaco. Finalmente, se hizo optimizaciones en el protocolo inicial, añadiéndose un tratamiento hipotónico con KCl 75mM para mejorar la visualización de cromosomas, pero a pesar de estos esfuerzos, la caracterización de cromosomas no fue viable. El número de cromosomas determinado para el babaco, se encuentra conservado dentro del género lo cual indica una estabilidad aparente en la homología cromosómica. El comparar el cariotipo del babaco con el de sus posibles parentales, es un primer paso para esclarecer los procesos de especiación del babaco. Se recomienda utilizar métodos alternativos como el cultivo celular y el uso de otras técnicas de tinción para mejorar la observación de cromosomas del babaco.