Regresar

Efecto de la L-carnitina sobre la criosupervivencia y capacidad fecundante de espermatozoides epididimarios caninos congelados y vitrificados

Abstract:

El objetivo de esta investigación fue evaluar el efecto de la L-carnitina adicionada a diluyentes de congelación y vitrificación, sobre la criosupervivencia y capacidad fecundante en esperma epididimario de perro. Para esto, se recuperó el esperma de 60 epidídimos provenientes de 30 perros adultos orquiectomizados mediante flujo retrógrado. Posteriormente se conformaron veinte agrupaciones o pools de esperma (3 muestras epididimarias/pool). Cada pool se dividió en 2 alícuotas, una para congelación y otra para vitrificación. Para la congelación, se usó el diluyente TCG-EY (Tris, ácido cítrico, glucosa, 20% yema de huevo) y 5% de glicerol y se suplementó con 5mM (T1) y 0mM (T2, control 1) de L-carnitina; y para la vitrificación se usó el diluyente TCG-EY y 250 mM de sacarosa y se suplementó con 5 mM (T3) y 0 mM (T4, control 2) de L-carnitina. La cinemática, integridad de las membranas y capacidad fecundante fue evaluada de las muestras espermáticas de los tratamientos T1, T2, T3 y T4, mediante un sistema computarizado CASA (SCA®- 2018), doble tinción fluorescente PI-PNA-FITC y FIV heteróloga (ovocitos bovinos), respectivamente. Después de la criopreservación, los resultados demostraron que el método de congelación produjo valores más altos (P<0,05) de motilidad progresiva (MP), velocidad curvilínea (VCL) y rectilínea (VSL), y frecuencia de batida de flagelo (BCF) que el método de vitrificación, independientemente de la adición de L-carnitina. La L-carnitina no mejoró (P>0,05) ningún parámetro cinemático de espermatozoides congelados o vitrificados. Sin embargo, L-carnitina, evidenció un efecto crioprotector debido a un incremento (P < 0,05) del porcentaje de espermatozoides con membrana plasmática intacta y acrosoma intacto después del proceso de congelación y vitrificación. En la evaluación de la capacidad fecundante, se evidenció que las muestras congeladas con L-carnitina obtuvieron una mayor proporción pronúcleos formados comparados con muestras vitrificadas sin L-carnitina (P < 0,05). En conclusión, la adición de L-carnitina a los diluyentes de congelación y vitrificación, demostró un efecto benéfico crioprotector del plasmalema y acrosoma, incluso de la capacidad fecundante de espermatozoides epididimarios de perro.