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Estandarización de la metodología de cromatografía de columna para el aislamiento de metabolitos activos a partir de extractos vegetales

Abstract:

El presente trabajo de investigación pretendió estandarizar la metodología de cromatografía de columna, para lo cual se realizó una marcha fitoquímica general de la especie Desmodium adscendens mediante cromatografía en capa fina (TLC), obteniéndose resultados positivos para los metabolitos activos flavonoides y terpenos. El fraccionamiento de cromatografía de columna se enfocó en la obtención de cantidades representativas de flavonoides debido a sus propiedades antiinflamatorias y antioxidantes conocidas, usando las siguientes variables: selección de la fase móvil y la carga de columna. Los extractos metanólicos secos libres del exceso de clorofila de la especie antes mencionada, fueron eluidos en las columnas con fases móviles de características polares y apolares y con una carga de 2,5% y 5%, cada fracción colectada fue evaluada en un análisis TLC obteniéndose como resultados que los flavonoides poseen mayor afinidad por la fase móvil polar y que la carga de columna con mejor eficacia y resolución es la de 2,5%. Finalmente, las fracciones cualitativamente idénticas correspondientes a los flavonoides fueron unidas para calcular su rendimiento final y para realizar el análisis de su actividad antioxidante, dando positividad a la misma con DPPH. La cromatografía de columna resultó ser una técnica poco confiable probablemente por la influencia de factores ambientales como la temperatura inter-día e intra-día por lo que no fue posible la estandarización de la metódica.