Regresar

Estudio de bombas de expulsión de antibióticos en cepas de Pseudomonas aeruginosa de orígen clínico

Abstract:

Pseudomonas aeruginosa es un importante patógeno intrahospitalario, y es el principal agente etiológico asociado a la mortalidad y morbilidad en pacientes con fibrosis quística (FQ). La multifarmacorresistencia (MDR) en P. aeruginosa es un fenómeno multifactorial, reconociéndose algunos mecanismos principales: inactivación de un antibiótico, modificaciones en el sitio blanco, así como cambios en la permeabilidad de la membrana por acción de componentes estructurales o por la activación de bombas de expulsión (BE). El objetivo de este trabajo fue analizar sistemas de expulsión de antibióticos, mutaciones en la región determinante de resistencia a quinolonas (QRDR) y expresión de la porina OprD, como mecanismos de resistencia presentes en cepas de P. aeruginosa aisladas de infecciones nosocomiales (IN) y de pacientes con FQ. Para ello se seleccionaron 21 cepas de P. aeruginosa a las que se les determinó la concentración inhibitoria mínima (CIM) a 22 antibióticos. Mediante métodos fenotípicos se detectó la posible producción de-lactamasas de espectro extendido (BLEEs), metalo- -lactamasas (MBL) y AmpC, así como las bombas de expulsión (BE) MexAB-OprM. MexCD-OprJ y MexXY. Por PCR se amplificaron los genes reguladores de las BE: mexR, nalC, nalD (MexAB-OprM), nfxB (MexCD-OprJ) y mexZ (MexXY), posteriormente se secuenciaron y analizaron con herramientas bioinformáticas. Se evaluó la expresión de los genes mexA y mexC mediante RT-PCR en tiempo real, con esta técnica también se estudió la expresión del gen oprD utilizando como gen normalizador rpoD. Finalmente, por PCR se amplificó la …