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Evaluaci?n de la respuesta de tres genotipos seleccionados de caf? robusta (Coffea canephora Pierre) mediante embriog?nesis som?tica indirecta y uso de Recipientes de Inmersi?n Temporal Automatizados, RITA?

Abstract:

La embriog?nesis som?tica asociada con el uso de medios l?quidos, ofrece m?ltiples ventajas para la propagaci?n masiva y su uso conjunto con biorreactores permite automatizar el proceso. Sin embargo aunque estas t?cnicas est?n ampliamente descritas, es importante que sean validadas y ajustadas a los materiales gen?ticos de inter?s. La presente investigaci?n tuvo como objetivo disponer de una metodolog?a eficiente para la propagaci?n masiva de genotipos de caf? robusta (Coffea canephora P.), mediante embriog?nesis som?tica indirecta y Recipientes de Inmersi?n Temporal RITA. Se utilizaron tres genotipos de caf? robusta seleccionados por el INIAP (NP-2024, NP-2044 y NP-4024), que fueron evaluados mediante dos estudios. El primero evalu? varias combinaciones de 2,4-D m?s kinetina a efecto de conseguir altos niveles de inducci?n a callog?nesis y embriog?nesis y el segundo para adecuar el proceso de regeneraci?n y germinaci?n mediante empleo de biorreactores RITA utilizando un protocolo de propagaci?n ya definido, que adem?s sirvi? como testigo. Los resultados mostraron que los genotipos fueron susceptibles de inducci?n, mostrando mejores respuestas a la combinaci?n C1 (0.25 mg/l 2,4-D + 2.00 mg/l KIN) a?adida al medio M1. Los genotipos lograron superar la fase de regeneraci?n utilizando la combinaci?n hormonal C1, a diferencia del genotipo NP-2044, que no produjo c?lulas embriog?nicas para dicha combinaci?n pero s? para el testigo (C6). Se registraron para cada tratamiento, un promedio de 2000 embriones som?ticos regenerados y alrededor 400 embriones germinados. La propagaci?n in vitro de caf? robusta tard? alrededor de 62 semanas hasta la obtenci?n de embriones germinados. El ANOVA mostr? diferencias significativas entre los tratamientos analizados para (<0.05) se?alando que la combinaci?n fitohormonal utilizada as? como el genotipo son factores que influyen fuertemente durante el proceso de propagaci?n.