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Evaluación de dos métodos de selección espermática por centrifugación y flotación de esperma canino epididimario fresco y criopreservado

Abstract:

El presente estudio evaluó dos métodos de selección de espermatozoides epididimarios de perros, uno por centrifugación en gradientes de densidad usando BoviPure (CGD-BoviPure), y otro por Swim-up. Se recuperaron muestras espermáticas de sesenta epidídimos mediante flujo retrógrado usando el diluyente TCG-YH (tris, ácido cítrico, glucosa + 20% de yema de huevo) y se conformaron veinte pools (3 muestras/pool). La selección espermática se realizó en muestras frescas individuales (n=60) o muestras agrupadas (n=20), ya sea frescas, refrigeradas (24 h) o congeladas-descongeladas (C/D). En cada muestra, un grupo control (sin seleccionar) fue incluido. Todas las muestras fueron evaluadas su cinética-morfometría y la integridad de las membranas espermáticas mediante el sistema CASA, (SCA) y la prueba de fluorescencia PI/PNA-FITC, respectivamente. Los resultados demostraron que CGD-BoviPure fue más efectivo en seleccionar espermatozoides de perro que el Swim-up y control, basado en incremento de la cinética e integridad de membranas plasmática (IMP) y acrosomal (IMA). En muestras individuales, la selección por CGD-BoviPure incrementó (P<0,05) la motilidad total y progresiva (MP), velocidades curvilínea (VCL) y rectilínea (VSL), linealidad (LIN), oscilación (WOB), frecuencia de batida de flagelo (BCF), IMP e IMA. Sin embargo, en muestras agrupadas, la selección por CGD-BoviPure mostró ser efectiva sólo en muestras refrigeradas y C/D, incrementando (P<0,01) la MP, VCL, WOB e IMP. Eficientemente, la selección de los espermatozoides C/D mediante CGD-BoviPure no varió (P>0,05) las dimensiones morfométricas de la cabeza comparados con sus valores antes y después de la congelación. En conclusión, la selección mediante CGD-BoviPure fue exitosa debido a que mejoró la calidad de los espermatozoides epididimarios caninos frescos y criopreservados.