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Evaluación de dos protocolos de congelación de espermatozoides epididimarios en la especie Canis Lupus familiaris

Abstract:

Esta investigación evaluó dos protocolos de congelación de espermatozoides epididimarios caninos sobre la criosupervivencia celular, uno convencional (CC) que usa vapores de nitrógeno líquido (NL2) estático, y otro ultrarrápido (CU) que sumerge directamente gotas de esperma (30 L) en NL2. Para este propósito, se usaron 60 epidídimos de 30 perros adultos orquiectomizados. Las muestras fueron recuperadas por flujo retrógrado y entonces se conformó 30 agrupaciones (3 muestras epididimarias / agrupación). Cada agrupación fue dividida en 2 alícuotas que fueron criopreservadas por CC y CU, usando glicerol (5%, v/v) y sacarosa (250 mM), respectivamente, adicionados al diluyente TCG-YH (tris, ácido cítrico, glucosa + 20% yema de huevo). Los resultados mostraron que el protocolo CU produjo menores porcentajes (P < 0,05) de motilidad total y progresiva e integridad de membrana acrosomal que el protocolo CC. Sin embargo, las variables cinéticas (velocidades curvilínea y rectilínea, rectitud, linealidad, oscilación, amplitud lateral de la cabeza y frecuencia de batida de flagelo) e integridad de la membrana plasmática (viabilidad) no difirieron (P > 0,05) entre ambos métodos de congelación. Eficientemente, el protocolo de congelación CU no varió (P > 0,05) el largo, ancho, área y perímetro de la cabeza espermática con respecto a los valores sin congelar. En conclusión, el protocolo CU afecta la motilidad en comparación con el protocolo CC, no obstante, el logro de los niveles de cinética y viabilidad junto con el mantenimiento de las dimensiones morfométricas de la cabeza abre buenas expectativas para su uso en la criopreservación eficiente de espermatozoides epididimarios de caninos domésticos y silvestres.