Analysis of Efflux Pump Genes in β-lactam Resistant Clinical Isolates of Pseudomonas aeruginosa from a Tertiary Level Hospital in Ecuador

Abstract:

Pseudomonas aeruginosa es un microorganismo responsable de una amplia variedad de infecciones y es uno de los principales patógenos multiresistentes ante antibióticos β-lactámicos. Uno de los principales mecanismos de resistencia en P. aeruginosa constituyen las bombas de eflujo. El objetivo del presente estudio fue caracterizar el mecanismo de bombas de eflujo mediante el estudio de expresión de 4 genes (mexA, mexX, oprJ y oprM) involucrados en este mecanismo en Pseudomonas aeruginosa. Cuarenta aislados clínicos (20 resistentes y 20 sensibles) fueron recolectados en el Laboratorio de Bacteriología del Hospital “Carlos Andrade Marin” en Quito-Ecuador. Los niveles de expression de los genes seleccionados fueron evaluados por RT-qPCR usando RpsL como gen constitutivo para el análisis de cuantificación relativa basado en el método ΔΔCt ajustado. La importancia de las bombas de eflujo como mecanismos de resistencia fue confirmada ya que el estudio de expresión de los genes relacionados con bombas de eflujo mostró sobreexpresión de ellos en todos los aislados fenotípicamente resistentes. Se realizó además un análisis fenotipo/genotipo comparando los resultados del antibiograma (AST) con los perfiles de expresión. La sobreexpresión de mexA (genotipo) mostró correlación con el fenotipo de resistencia a TPZ, mientras que el genotipo mexX se correlacionó con los fenotipos de resistencia a IPM, MEM y FEP. En conclusion, los patrones de expression de los genes relacionados con bombas de eflujo sugieren la presencia de mecanismos de resistencia basados en transmisión horizontal que posibilitan …

Año de publicación:

2017

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