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IDENTIFICACIÓN MOLECULAR DE BRUCELLA SPP. EN MUESTRAS DE SANGRE DE GANADO BOVINO DE LA PROVINCIA DE ZAMORA CHINCHIPE”

Abstract:

La brucelosis es una enfermedad infecciosa producida por bacterias del género Brucella. Produce graves afectaciones a la salud y provoca grandes pérdidas económicas. Existen reportes publicados, por el Centro Internacional de Zoonosis del Ecuador y otras instituciones, sobre la epidemiología de brucelosis en Ecuador, sin embargo la información en la zona de estudio es escasa. El diagnóstico de la enfermedad se basa en la ejecución de pruebas de tamizaje y en pruebas confirmatorias. Las pruebas serológicas tienen sus limitaciones, por lo que el desarrollo de métodos diagnósticos rápidos, sensibles y específicos utilizando técnicas moleculares como la PCR, permite diagnosticar y tratar oportunamente esta enfermedad. Por lo cual los objetivos de esta investigación son: Realizar un tamizaje mediante la ejecución de la prueba Rosa de Bengala en muestras de suero bovino, estandarizar una prueba de PCR para el diagnóstico de brucelosis a partir de suero sanguíneo y mediante el empleo de ésta técnica identificar el género Brucella; y a través de su secuenciamiento, corroborar la identidad de la bacteria en la provincia de Zamora Chinchipe. Para todo ello se empleó la prueba serológica Rosa de Bengala y la estandarización de la PCR en muestras de suero sanguíneo. El secuenciamiento de los amplicones se lo realizó en Macrogen Inc. Seul - Korea, y la limpieza de las secuencias se la realizó mediante los programas DNA Baser V4.36.0 y BioEdit y el alineamiento y construcción de árboles filogenéticos mediante MEGA 6.05. El 0,4% de las muestras fue positivo por serología y el 2,9% sospechosas y por PCR el 7,4% de las muestras fueron positivas, los amplicones se secuenciaron y se comprobó la identidad de la bacteria. Mediante los programas informáticos se relaciono a las Brucellas encontradas en la provincia de Zamora Chinchipe con cepas de referencia de todas las especies de Brucella. El presente trabajo se convierte en el primero realizado a nivel molecular que identifica al género Brucella en muestras de sangre en ganado de la provincia de Zamora Chinchipe.