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Identificación de biovares de ralstonia solanacearum mediante pruebas bioquímicas y moleculares a partir de aislados obtenidos de Musa spp.

Abstract:

La bacteria Ralstonia solanacearum es considerada de alta agresividad, provoca la enfermedad del moko que conduce a la muerte repentina de Musáceas y otro tipo de cultivos. La infección ha llegado a varios países en Latinoamérica, entre los cuales se reportó la posible introducción de esta bacteria al Ecuador desde Colombia; país que tenía poco o nulo conocimiento sobre esta bacteria, motivo por el cual aumentó el interés de su estudio para conocer a que provincias se ha dispersado y lograr establecer en futuros estudios la ecología y epidemiología de la misma. Para el aislamiento de la bacteria se utilizó el Medio Semiselectivo Sur África (SMSA) que identifica las características de las colonias bacterianas y su posterior purificación fue realizada mediante el medio Agar Nutritivo. Conjuntamente se comparó la detección de la bacteria con la técnica DAS-ELISA y el sistema de identificación microbiológica (Biolog Inc), en el que se determinó los componentes bioquímicos; además se realizó la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) para posteriormente identificar biovares por medio de pruebas metabólicas. Se evaluaron 80 muestras provenientes de fruto y pseudotallo de distintas variedades de banano provenientes de diferentes provincias del país que fueron proporcionados por la Agencia Ecuatoriana de Aseguramiento de la Calidad del Agro (AGROCALIDAD). El medio SMSA permitió detectar colonias de R solanacearum y el sistema de identificación microbiológica Biolog detectó bacterias antagónicas. La técnica DAS-ELISA permitió detectar R solanacearum y evaluar la cantidad de inóculo a concentraciones mayores de 108 UFCmL. Con la técnica PCR se confirmó la bacteria y mediante resultados positivos se identificó biovares por medio de la degradación de disacáridos (celobiosa, lactosa y maltosa) y oxidación de polialcoholes (dulcitol, sorbitol y manitol); con lo cual se obtuvo tres tipos de biovares: biovar 1 en la provincia del Guayas, biovar 2 en Manabí y Guayas y biovar 3 en Manabí, Sucumbíos y Napo.