Análisis funcional de las polifenol oxidasas (PPOs) de frutos de níspero (Eriobotrya japonica Lindl.): desarrollo y aplicación de herramientas moleculares y proteómicas

Abstract:

La Polifenol Oxidasa (PPO) es la enzima responsable del pardeamiento enzimático en plantas, esta enzima produce la pérdida de calidad y del valor económico de muchas frutas y hortalizas frescas o procesadas. Para analizar el efecto de las PPOs en plantas, se han desarrollado numerosos estudios dedicados a la bioquímica y propiedades catalíticas de la enzima. Mediante Western blot, se ha observado la presencia de varias bandas de proteína de peso molecular de 55 a 66 kDa de frutos y hojas de diversas rosáceas (incluyendo el níspero). Por otra parte, el empleo de LC-MS/MS y secuenciación de novo, ha permitido obtener una amplia cobertura de secuencia. El alineamiento de péptidos con su proteína homóloga más similar reveló posiciones de aminoácidos divergentes que permitieron hacer una hipótesis del número mínimo de genes que codifican para las proteínas de níspero analizadas. Esto demuestra, que hay bases genéticas y evidencias experimentales que apoyan la existencia en diversas plantas de diferentes isoformas de PPO en el mismo tejido y en un mismo estadio de desarrollo, apuntando al desempeño de múltiples funciones. En ese trabajo, se hace una aproximación al problema de obtención de información precisa y confiable acerca del origen de una proteína perteneciente a una familia multigénica de especies poco representadas como es el caso de la PPO frutos de níspero. Para ello, nos hemos plateado desarrollar herramientas proteómicas y moleculares para analizar la implicación y función de la enzima PPO en el pardeamiento enzimático, un fenómeno ocasionado de forma natural o por daños …

Año de publicación:

2012

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