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Validación del método para la determinación de vitamina C (ácido ascórbico) en alimentos por Cromatografía Líquida de Alta Eficacia (HPLC)en el laboratorio ECUACHEMLAB Cía. Ltda.

Abstract:

La validación de un método es un requisito importante para garantizar que los laboratorios de ensayo emitan resultados confiables y reproducibles. La validación se realizó empleando la metodología descrita por la AOAC 967.21 complementada con la metodología de (Ledezma - Gairaud, 2004), bajo norma ISO/IEC 17025. El método desarrollado produce una respuesta lineal con un coeficiente de correlación r=0,999 para cada curva de calibración, el LD igual a 0,0002 mg/ml y el LC igual a 0,007 mg/ml. El rango de trabajo comprende valores de 0,007 mg/ml hasta 0,1448 mg/ml para la concentración de ácido ascórbico que va desde 7,25 mg hasta 142,73 mg de vitamina C por cada 100 g de muestra. El coeficiente de variación fue menor al 2% para repetibilidad y reproducibilidad. El % de recuperabilidad se encontró en el rango establecido para HPLC con un valor igual al 99,32 %. Los límites de repetibilidad y reproducibilidad con valores de 2,16 mg/100g y 2,61 mg/100g de ácido ascórbico respectivamente. La incertidumbre combinada del método para todos los niveles de concentración empleadas con un valor igual a +/- 0,95 y la incertidumbre expandida con un valor igual a +/-1,91 expresado en unidades de mg de vitamina C por cada 100 g de muestra; se empleó como criterio de aceptación que el valor de la incertidumbre sea menor al 30% del rango bajo dando como resultado para la incertidumbre encontrada 26,31% cumpliendo de este modo con el objetivo de validación planteado.