Clonaje, secuenciacion y expresion de dmrt1 en pez sapo, Halobatrachus dudactylus

Abstract:

Se estudia la implicación del gen dmrt1 en el dimorfismo sexual y en la gametogénesis del pez sapo, Halobatrachus didactylus, teleósteo muy evolucionado y ampliamente utilizado como organismo modelo en investigaciones básicas y aplicadas en acuicultura y medio ambiente. Los mecanismos genéticos y moleculares determinantes del sexo varían considerablemente entre las diferentes especies. El gen dmrt1 pertenece a una familia conservada de reguladores transcripcionales de dominio DM que participan en la base de la cascada de determinación del sexo, y este se ha asociado a la regulación del sexo en vertebrados. Aunque no todos los genes de esta familia están aparentemente relacionados con la diferenciación sexual, el dmrt1 está implicado en el desarrollo testicular en una gran variedad de vertebrados, incluyendo diferentes peces teleósteos. Aplicando técnicas moleculares de amplificación y clonaje se obtuvo la secuencia del cDNA del dmrt1. La obtención de la misma nos permitió continuar con un estudio de expresión diferencial gonadal y somática por q-PCR cuantitativa, así su expresión por hibridación in situ y la localización de proteínas, mediante inmunohistoquímica, utilizando un anticuerpo específico (anti sapo DMRT1). Los resultados obtenidos muestran como la expresión de dmrt1 es significativa en testículo, evidenciando la gran importancia de este gen en la espermatogénesis. Las señales obtenidas tanto por hibridación in situ como por inmunohistoquímica muestran una gran intensidad de marcaje (sonda y anticuerpo) en espermatogonias y espermatocitos, y escasa señal en espermátidas. La …

Año de publicación:

2012

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