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Construcción de bibliotecas de ADNc a partir de hojas de los cultivares de banano Calcutta 4 y Niyarma Yik inoculados con Pseudocercospora fijiensis Morelet

Abstract:

Los estudios moleculares de la interacción planta-patógeno, son de gran importancia para la identificación de genes relacionados tanto con el proceso patogénico, como con la defensa de la planta. Estos genes podrán ser utilizados en los programas de mejoramiento genético, para la obtención de plantas con resistencia a enfermedades. El objetivo de este trabajo fue la construcción de bibliotecas de ADN complementario (ADNc), a partir de dos cultivares de banano (uno resistente: Calcutta 4 y otro susceptible: Niyarma yik) a la enfermedad de la Sigatoka negra, infectados artificialmente con el aislado de Pseudocercospora fijiensis Morelet CCIBP-Pf1. La síntesis de la primera cadena de ADNc, fue a partir de 1 μg de ARN total con el oligonucleótido dT y la calidad de la misma fue comprobada por la reacción en cadena de la polimerasa con los oligonucleótidos específicos para el gen del citocromo b. La síntesis de la segunda cadena de ADNc, fue realizada por marcaje homopolimérico con la combinación dCBamH I+ dTNot I. Fueron obtenidas cuatro bibliotecas de ADNc a partir de plantas, en dos períodos de tiempo después de la infección con el patógeno. Fue realizada la secuenciación nucleotídica de 41 clones de una de las bibliotecas de Niyarma Yik y la información obtenida de las mismas se corresponde con genes relacionados con hongos.